穩轉細胞株是指經過基因工程技術穩定表達特定外源蛋白的細胞株。這些細胞株不僅可以用于基礎研究，還可以應用于藥物研發和生物制藥等領域。
穩轉細胞株的選擇、篩選和保存：
1.細胞株的選擇
選擇適合基因轉染的細胞株非常重要。通常選擇易于培養和轉染，細胞生長快速和存活率高的細胞株。例如，HEK293,CHO和NIH3T3等細胞株被廣泛應用于細胞株的制備中。
2.外源基因的構建和轉染
外源基因是指要表達的外源蛋白編碼的基因。為了實現外源基因的表達，需要將其轉染進目標細胞中。轉染方法包括化學法、電穿孔法、病毒載體法等多種方法。在進行基因轉染時，應注意轉染條件的選擇和優化，例如轉染試劑的濃度、轉染時間、細胞密度等因素。
3.穩定細胞株的篩選
在基因轉染后，需要篩選出穩定表達目標蛋白的細胞株。通常采用藥物篩選法或流式細胞術篩選法。藥物篩選法是通過將藥物加入培養基來抑制非穩定細胞株的生長，最終篩選出穩定細胞株。流式細胞術篩選法則根據外源蛋白的表達水平，利用熒光染料等檢測手段篩選出穩定細胞株。
4.穩定細胞株的保存和擴增
經過篩選后，需要對穩定細胞株進行保存和擴增。常用的方法是將細胞株凍存，以備之后的實驗或生產使用。在存放過程中，應嚴格控制溫度和保持液氮冷凍狀態。在需要擴增細胞株時，應根據需要制定培養策略，如生長溫度、培養基配方和培養時間等。
總之，穩轉細胞株的制備需要多個步驟和技術的支持。細胞株的得到將極大地推進基礎研究和生物制藥的發展。
更新時間：2023-04-04 
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