表達載體是指具有宿主細胞基因表達所需調(diào)控元件,能使克隆的基因在宿主細胞內(nèi)轉(zhuǎn)錄與翻譯的載體。也就是說,克隆載體只是攜帶外源基因,使其在宿主細胞內(nèi)擴增;表達載體不僅使外源基因擴增,還使其表達。外源基因在受體細胞內(nèi)表達與否及表達水平受到許多因素(調(diào)控元件)的制約。
蛋白表達質(zhì)粒優(yōu)勢說明:
各種表達系統(tǒng)各有其優(yōu)缺點,大腸桿菌和酵母表達系統(tǒng)蛋白表達水平高,生產(chǎn)成本低,但它們的加工修飾體系與昆蟲細胞、哺乳動物細胞不*相同;哺乳動物細胞產(chǎn)生的蛋白質(zhì)更接近于天然蛋白質(zhì),但其表達量低、操作繁瑣。
各種表達系統(tǒng)由于翻譯后的加工不*相同,因而產(chǎn)生的重組蛋白的生物學活性和免疫原性有時會有差別。因此,選擇表達系統(tǒng)時,必須充分考慮各種因素,如所需要表達的蛋白是否有毒性,是否有活性,是否需要糖基化,還需要考慮成本、產(chǎn)量及純化路線和安全性。
蛋白表達質(zhì)粒的接合轉(zhuǎn)移方法:是細菌遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)移的一個重要方式。在質(zhì)粒轉(zhuǎn)移過程中,供體菌和受體菌通過結(jié)合作用緊密接觸,質(zhì)粒從供體細胞向受體轉(zhuǎn)移,同時進行質(zhì)粒復制。按能否自主轉(zhuǎn)移,可以將天然存在的質(zhì)粒分為轉(zhuǎn)移型質(zhì)粒和非轉(zhuǎn)移型質(zhì)粒兩大類。這里要注意的是,獲得質(zhì)粒的細菌可隨之而獲得一些生物學特性,如耐藥性或產(chǎn)生細菌素的能力等。從環(huán)境友好出發(fā),實驗室里的廢棄菌液,一定要滅過菌才能倒哦。