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            我的位置:首頁  >  產品中心  >  質粒菌株  >  質粒  >  P3144pLKO.1-EGFP-Puro基因沉默質粒
            pLKO.1-EGFP-Puro基因沉默質粒
            • 產品型號:P3144
            • 廠商性質:生產廠家
            • 更新時間:2024-05-30
            • 訪  問  量:504
            簡要描述:

            pLKO.1-EGFP-Puro基因沉默質粒
            啟動子U6
            復制子pUC
            原核抗性Amp
            真核抗性Puro
            克隆菌株Stbl3
            培養條件37℃
            表達宿主哺乳細胞
            質粒宿主哺乳細胞,慢病毒
            質粒用途基因沉默
            片段類型shRNA
            原核抗性氨芐青霉素
            真核抗性嘌呤霉素

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            產品詳情

            注意事項:轉化前請準確查找該質粒相應的抗生素名稱、抗生素使用濃度、感受態名稱和培養溫度。
            1、收到質粒干粉后請先5000rpm離心1min,再加入20μl~50μl無菌水或 pH8.0  1*TE緩沖液來溶解質粒,室溫放置1min

            2、從-80冰箱中取出相應的感受態,置于冰盒上解凍,并做好標記;

            3、取2μl質粒加至100μl感受態中,冰浴30min

            442熱激90s,再冰浴2min

            5、加入900μl無抗的LB液體培養基,180rpm震蕩培養45min

            66000rpm離心5min,僅留100ul上清混勻菌體沉淀;

            7、混勻后的菌液加至對應抗性的LB平板上,倒入適量玻璃珠,涂勻液體;

            8、將平板正向培養1h,再倒置培養12h~16h

            9、挑取單克隆菌落至對應抗性的LB液體培養基中,震蕩培養12h~16h,根據實驗需要提取質粒

             

            pCDH-CMV-MCS-EF1-Hygro蛋白表達質粒
            pLKO.1-EGFP-Puro基因沉默質粒
            pLVX-TetOne-Puro蛋白表達,誘導質粒
            pLVML-3×FLAG-MCS-Puro蛋白表達質粒
            pCDH-CMV-MCS-EF1-turboRFP-T2A-Puro蛋白表達質粒
            pDC316-ZsGreen1-shRNA基因沉默質粒
            041 pLVPTH2-tTR-KRAB-Cerulean基因沉默質粒
            pSIH1-H1-copGFP-T2A-Puro基因沉默質粒
            pLVshRNA-EGFP(2A)Puro基因沉默質粒
            pLVX-shRNA2基因沉默質粒

             

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