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一、載體構建的基本實驗步驟
(1)目的DNA片段和載體的制備；
(2)目的DNA片段和載體的連接；
(3)連接產物的轉化；
(4)克隆篩選。
(5)測序驗證及結果交付
二、詳細內容
1、以PCR擴增為基礎的各類載體構建，如大腸桿菌表達載體、酵母表達載體、桿狀病毒表達載體、哺乳動物表達載體；報告基因載體等；
2、基因定點突變，包括單點突變，多點突變，基因缺失等；
3、載體元件替換和改造；
4、siRNA載體和miRNA表達載體構建；
5、過表達載體構建。
| pLKO.1-2×shRNA-Puro基因沉默質粒 |
| pHAGE-CMV-attR2 C XbaI EGFP taa XbaI蛋白表達質粒 |
| pAtU6-26-sgRNA-35S-EGFP-Cas9基因編輯質粒 |
| pAAV-EFS-CjCas9-eGFP-HIF1a基因編輯質粒 |
| pLVshRNA-EGFP(2A)Puro-Notch1-shRNA2(rat)基因沉默質粒 |
| pLVshRNA-EGFP(2A)Puro-WTAP-shRNA1(human)基因沉默質粒 |
| pLVshRNA-EGFP(2A)Puro-SNHG9-shRNA3(human)基因沉默質粒 |
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