pBV220蛋白表達質粒
啟動子pR/pL
復制子pUC
質粒分類大腸桿菌載體；蛋白表達質粒
質粒大小3666bp
原核抗性Amp
克隆菌株DH5α
培養(yǎng)條件30℃
表達宿主大腸桿菌
誘導方式42度
5'測序引物pBV220-F: 5′-AAGAAGGGCAGCATTCAAAG-3‘
3'測序引物pBV220-R: 5′-CTGCGTTCTGATTTAATCTG-3‘

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注意事項：轉化前請準確查找該質粒相應的抗生素名稱、抗生素使用濃度、感受態(tài)名稱和培養(yǎng)溫度。
1、收到質粒干粉后請先5000rpm離心1min，再加入20μl~50μl無菌水或 pH8.0 的 1*TE緩沖液來溶解質粒，室溫放置1min；

2、從-80℃冰箱中取出相應的感受態(tài)，置于冰盒上解凍，并做好標記；

3、取2μl質粒加至100μl感受態(tài)中，冰浴30min；

4、42℃熱激90s，再冰浴2min；

5、加入900μl無抗的LB液體培養(yǎng)基，180rpm震蕩培養(yǎng)45min；

6、6000rpm離心5min，僅留100ul上清混勻菌體沉淀；

7、混勻后的菌液加至對應抗性的LB平板上，倒入適量玻璃珠，涂勻液體；

8、將平板正向培養(yǎng)1h，再倒置培養(yǎng)12h~16h；

9、挑取單克隆菌落至對應抗性的LB液體培養(yǎng)基中，震蕩培養(yǎng)12h~16h，根據(jù)實驗需要提取質粒

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