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            昆蟲表達質粒
            • 產品型號:上海
            • 廠商性質:生產廠家
            • 更新時間:2025-06-09
            • 訪  問  量:303
            簡要描述:

            昆蟲表達質粒注意事項:轉化前請準確查找該質粒相應的抗生素名稱、抗生素使用濃度、感受態(tài)名稱和培養(yǎng)溫度。

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            昆蟲表達質粒注意事項:轉化前請準確查找該質粒相應的抗生素名稱、抗生素使用濃度、感受態(tài)名稱和培養(yǎng)溫度。


            1
            、收到質粒干粉后請先5000rpm離心1min,再加入20μl~50μl無菌水或 pH8.0  1*TE緩沖液來溶解質粒,室溫放置1min

            2
            、從-80冰箱中取出相應的感受態(tài),置于冰盒上解凍,并做好標記;

            3
            、取2μl質粒加至100μl感受態(tài)中,冰浴30min

            4
            42熱激90s,再冰浴2min

            5
            、加入900μl無抗的LB液體培養(yǎng)基,180rpm震蕩培養(yǎng)45min

            6
            6000rpm離心5min,僅留100ul上清混勻菌體沉淀;

            7
            、混勻后的菌液加至對應抗性的LB平板上,倒入適量玻璃珠,涂勻液體;

            8
            、將平板正向培養(yǎng)1h,再倒置培養(yǎng)12h~16h

            9
            、挑取單克隆菌落至對應抗性的LB液體培養(yǎng)基中,震蕩培養(yǎng)12h~16h,根據實驗需要提取質粒

             

            名稱 pIZ-OpIE-EGFP-MCS-V5-His
            別稱 -
            質粒宿主 昆蟲細胞
            質粒用途 蛋白表達
            片段類型 ORF
            片段物種 空載體
            原核抗性 Zeo
            篩選標記 Zeo
            熒光標記 綠色
            啟動子 OpIE-2
            復制子 pUC
            感受態(tài) DH5a
            溫度 37度
            背景載體 pIZ-V5-His
            正向引物 EGFP-F3
             
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