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            我的位置:首頁  >  產品中心  >  質粒菌株  >  質粒  >  P72354pT3-EF1a-HA
            pT3-EF1a-HA
            • 產品型號:P72354
            • 廠商性質:生產廠家
            • 更新時間:2025-06-15
            • 訪  問  量:201
            簡要描述:

            名稱pT3-EF1a-HA
            別稱-
            質粒宿主哺乳細胞
            質粒用途蛋白表達

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            產品詳情

            名稱pT3-EF1a-HA
            別稱-
            質粒宿主哺乳細胞
            質粒用途蛋白表達
            片段類型ORF
            片段物種空載體
            原核抗性Amp
            啟動子EF1a
            復制子pUC
            感受態DH5a
            溫度37度
            背景載體pT3-myr-AKT-HA(mouse)
            正向引物PEF-F

             


            注意事項:轉化前請準確查找該質粒相應的抗生素名稱、抗生素使用濃度、感受態名稱和培養溫度。


            1
            、收到質粒干粉后請先5000rpm離心1min,再加入20μl~50μl無菌水或 pH8.0  1*TE緩沖液來溶解質粒,室溫放置1min

            2
            、從-80冰箱中取出相應的感受態,置于冰盒上解凍,并做好標記;

            3
            、取2μl質粒加至100μl感受態中,冰浴30min

            4
            42熱激90s,再冰浴2min

            5
            、加入900μl無抗的LB液體培養基,180rpm震蕩培養45min

            6
            6000rpm離心5min,僅留100ul上清混勻菌體沉淀;

            7
            、混勻后的菌液加至對應抗性的LB平板上,倒入適量玻璃珠,涂勻液體;

            8
            、將平板正向培養1h,再倒置培養12h~16h

            9
            、挑取單克隆菌落至對應抗性的LB液體培養基中,震蕩培養12h~16h,根據實驗需要提取質粒


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