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            我的位置:首頁  >  產(chǎn)品中心  >  質(zhì)粒菌株  >  質(zhì)粒  >  P72610pCMV-DMBT1(human)-circRNA-Neo
            pCMV-DMBT1(human)-circRNA-Neo
            • 產(chǎn)品型號(hào):P72610
            • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
            • 更新時(shí)間:2025-06-15
            • 訪  問  量:133
            簡要描述:

            名稱pCMV-DMBT1(human)-circRNA-Neo
            別稱circ_0020285
            質(zhì)粒宿主哺乳細(xì)胞
            質(zhì)粒用途轉(zhuǎn)錄調(diào)控

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            產(chǎn)品詳情

            名稱pCMV-DMBT1(human)-circRNA-Neo
            別稱circ_0020285
            基因長394bp
            質(zhì)粒宿主哺乳細(xì)胞
            質(zhì)粒用途轉(zhuǎn)錄調(diào)控
            片段類型circRNA
            片段物種
            原核抗性Amp
            篩選標(biāo)記Neo/G418
            啟動(dòng)子CMV
            復(fù)制子pUC
            感受態(tài)DH5a
            溫度37度
            背景載體pCDNA3.1(+) CircRNA Mini Vector
            正向引物CMV-F

             


            注意事項(xiàng):轉(zhuǎn)化前請(qǐng)準(zhǔn)確查找該質(zhì)粒相應(yīng)的抗生素名稱、抗生素使用濃度、感受態(tài)名稱和培養(yǎng)溫度。


            1
            、收到質(zhì)粒干粉后請(qǐng)先5000rpm離心1min,再加入20μl~50μl無菌水或 pH8.0  1*TE緩沖液來溶解質(zhì)粒,室溫放置1min

            2
            、從-80冰箱中取出相應(yīng)的感受態(tài),置于冰盒上解凍,并做好標(biāo)記;

            3
            、取2μl質(zhì)粒加至100μl感受態(tài)中,冰浴30min

            4
            42熱激90s,再冰浴2min

            5
            、加入900μl無抗的LB液體培養(yǎng)基,180rpm震蕩培養(yǎng)45min

            6
            6000rpm離心5min,僅留100ul上清混勻菌體沉淀;

            7
            、混勻后的菌液加至對(duì)應(yīng)抗性的LB平板上,倒入適量玻璃珠,涂勻液體;

            8
            、將平板正向培養(yǎng)1h,再倒置培養(yǎng)12h~16h

            9
            、挑取單克隆菌落至對(duì)應(yīng)抗性的LB液體培養(yǎng)基中,震蕩培養(yǎng)12h~16h,根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要提取質(zhì)粒


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