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            pU6-DDX5(human)-sgRNA2-Cas9-EGFP
            • 產(chǎn)品型號:P73461
            • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
            • 更新時間:2025-06-30
            • 訪  問  量:183
            簡要描述:

            名稱pU6-DDX5(human)-sgRNA2-Cas9-EGFP
            別稱AAGTCTACTTGTATCTACGG
            質(zhì)粒宿主哺乳細胞
            質(zhì)粒用途基因編輯

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            產(chǎn)品詳情

            名稱pU6-DDX5(human)-sgRNA2-Cas9-EGFP
            別稱AAGTCTACTTGTATCTACGG
            質(zhì)粒宿主哺乳細胞
            質(zhì)粒用途基因編輯
            片段類型CRISPR
            片段物種
            原核抗性Amp
            熒光標記綠色
            啟動子U6
            復制子pUC
            感受態(tài)Stbl3
            溫度37度
            背景載體pX458
            正向引物U6-F

             


            注意事項:轉(zhuǎn)化前請準確查找該質(zhì)粒相應的抗生素名稱、抗生素使用濃度、感受態(tài)名稱和培養(yǎng)溫度。


            1
            、收到質(zhì)粒干粉后請先5000rpm離心1min,再加入20μl~50μl無菌水或 pH8.0  1*TE緩沖液來溶解質(zhì)粒,室溫放置1min

            2
            、從-80冰箱中取出相應的感受態(tài),置于冰盒上解凍,并做好標記;

            3
            、取2μl質(zhì)粒加至100μl感受態(tài)中,冰浴30min

            4
            42熱激90s,再冰浴2min

            5
            、加入900μl無抗的LB液體培養(yǎng)基,180rpm震蕩培養(yǎng)45min

            6
            6000rpm離心5min,僅留100ul上清混勻菌體沉淀;

            7
            、混勻后的菌液加至對應抗性的LB平板上,倒入適量玻璃珠,涂勻液體;

            8
            、將平板正向培養(yǎng)1h,再倒置培養(yǎng)12h~16h

            9
            、挑取單克隆菌落至對應抗性的LB液體培養(yǎng)基中,震蕩培養(yǎng)12h~16h,根據(jù)實驗需要提取質(zhì)粒


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