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| 名稱 | pCMV-ESR1(human)-8×His-Neo |
| 別稱 | NM_000125.4;ER; Era; ESR; ESRA; ESTRR; NR3A1 |
| 基因長 | 1785bp |
| 質粒宿主 | 哺乳細胞 |
| 質粒用途 | 蛋白表達 |
| 片段類型 | ORF |
| 片段物種 | 人 |
| 原核抗性 | Amp |
| 篩選標記 | Neo/G418 |
| 啟動子 | CMV |
| 復制子 | pUC |
| 感受態 | DH5a |
| 溫度 | 37度 |
| 背景載體 | pEnCMV-MCS-8×His-SV40-Neo |
| 正向引物 | CMV-F |
注意事項:轉化前請準確查找該質粒相應的抗生素名稱、抗生素使用濃度、感受態名稱和培養溫度。
1、收到質粒干粉后請先5000rpm離心1min,再加入20μl~50μl無菌水或 pH8.0 的 1*TE緩沖液來溶解質粒,室溫放置1min;
2、從-80℃冰箱中取出相應的感受態,置于冰盒上解凍,并做好標記;
3、取2μl質粒加至100μl感受態中,冰浴30min;
4、42℃熱激90s,再冰浴2min;
5、加入900μl無抗的LB液體培養基,180rpm震蕩培養45min;
6、6000rpm離心5min,僅留100ul上清混勻菌體沉淀;
7、混勻后的菌液加至對應抗性的LB平板上,倒入適量玻璃珠,涂勻液體;
8、將平板正向培養1h,再倒置培養12h~16h;
9、挑取單克隆菌落至對應抗性的LB液體培養基中,震蕩培養12h~16h,根據實驗需要提取質粒
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